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标签融合卵白的高效色谱填料

字号+ 作者:果小编 来源:原创 2018-01-21 01:03 我要评论()

MBP标签分子量较大,有助于提高融合表达产物的可溶性,特别适合希望提高产物溶解性的融合表达,或者是因为分子量......

MBP标签分子量较大,有助于提高融合表达产物的可溶性,特别适合希望提高产物溶解性的融合表达,或者是因为分子量小容易被降解而难以稳定纯化的分子。

StrepTag(II) 8氨基酸小标签是不同于6xHis Taq一个新选择。我们早已熟知biotin和streptavidin之间能够高度特异的结合,这种特异性结合早已广泛用于免疫或者非放标记反应中。这种8个氨基酸的小标签Strep•Tag(II)正好能特异的结合到streptavidin上。streptavidin与小标签的结合位点经过特殊耦合改造成为StrepTactin,与Strep•Tag II融合标签的结合力超出普通streptavidin约100倍,确保了其最优的结合特性。当表达产物经过Strep•Tactin亲和纯化柱时,融合表达Strep•Tag II的融合蛋白高特异地结合在亲和柱上,经过反复洗涤杂蛋白后,可以用一种生物素的类似物——2.5 mM脱硫生物素,在温和的PBS或者其他生理条件缓冲系统就能一步彻底洗脱目的蛋白,温和条件有助于保持蛋白的活性。StrepTag(II)个子小(8个氨基酸)、对蛋白活性影响较小、亲和纯化方便。

当选择这类融合表达标签进行融合表达,就需要选择合适的亲和纯化填料。

Dextrin Sepharose™ High Performance 是一种高效色谱填料,有25ml 和100 ml 两种专门针对实验室使用的包装,http://www.guopupu.com/apple_pay/ Apple TV,可快速、方便的用于亲合纯化带有麦芽糖结合蛋白标签(MBP-tag)的融合蛋白。

StrepTactin™ Sepharose High Performance1提供了通过亲和层析的方法纯化Strep ( II )标记的重组蛋白。有 10 和 50 ml 两种针对实验室使用的包装,用于高效和批量纯化 Strep(II)-标签融合蛋白。牢固且又稳定的琼脂糖填料基架可带来高分辨率,尖锐集中的洗脱峰和高的重现性。纯化在物理条件下进行,且温和的洗脱条件确保了目标蛋白的活性。由于结合的高度专一性,只需一步洗脱即可达到高纯度。。

这两种亲合色谱填料中的高效颗粒极为细腻(直径34µm),能提供高结合载量和尖锐的浓缩洗脱峰,并最大程度的降低后续的目标蛋白浓缩时间。

Dextrin Sepharose High Performance 和 StrepTactin High Performance media的优势:

在提高纯化量时,这两种填料非常容易被填装到实验室用的层析柱中,比如Tricorn™和XK等 允许在生理条件下进行纯化和温和洗脱,保持蛋白活性和空间结构一步法快速亲和纯化,获得高纯度目的蛋白尖锐且非常集中的洗脱峰温和的洗脱条件保护了目标蛋白的活性替代金属离子螯和层析方法,避免重金属离子对蛋白的干扰可以配合使用常见的水性缓冲液,用0.5 M NaOH重新配制溶液也非常简便。兼容广泛的还原剂,去垢剂,变形剂和其他添加剂,耐NaOH的清洗还有1和5 ml两种已经包装填料的MBPTrap™ HP 和 StrepTrap™ HP 色谱柱,可供方便、快速、可靠的分别纯化 MBP-和Strep(II)-标签融合蛋白之用

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